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Profesorado Carlos Bocos de Prada.
Juan José Álvarez Millán.
Enrique Orozco.
Javier Alba.
Jose Ramón Letón.
Nuno Henriques Gil.
Elena Martín Garabato.
José Mª Sánchez Aparicio.
Victoria Ferrín Ortega.
Eva Ruiz Casares.
Mª Haro García.
Teresa Perucho Alcalde. Objetivos generales
Formar y capacitar a titulados superiores que realicen o pretendan realizar diagnóstico molecular, profundizando tanto en en los aspectos metrológicos del mismo (obtención y conservación de muestras, técnicas a utilizar, con especial dedicación a las más novedosas y tratamiento de los datos mediante técnicas estadísticas, informáticas e Internet) como en los semiológicos (uso e interpretación en enfermedades monogénicas y en enfermedades complejas). Además se hará especial hincapié en la la importancia de controlar la calidad de los resultados en este tipo de pruebas diagnósticas dado que es necesario educar y concienciar a los profesionales sobre la necesidad no sólo de la nuevas herramientas diagnósticas sino también de sus limitaciones, para hacer un uso adecuado de las mismas.
Objetivos
específicos
Tras unas nociones básicas de Biología Molecular, se aborda el aspecto semiológico del diagnóstico molecular: cómo aplicar la metrología en el diagnóstico, pronóstico y caracterización de enfermedades genéticas (tanto hereditarias como adquiridas), microbianas y víricas. Se pretende que el alumno adquiera conocimientos teóricos y, esencialmente, prácticos en las técnicas (básicas y avanzadas) de manejo de DNA y
RNA: PCR, RT-PCR, arrays, etc, adquiriendo destreza en la utilización de
termociclador, hibridador, densitómetro, detector de radioisótopos y analizador de imágenes
(Phosphorimager), sistema de electroforesis capilar, secuenciador, sistemas de electroforesis bidimensional y demás aparatos, imprescindibles actualmente en el laboratorio de diagnóstico molecular. Se trata además, de poder llegar a interpretar los resultados obtenidos, así por ejemplo, desde productos de una PCR hasta perfiles de expresión génica característicos de cada patología, pero, eso sí, realizando un adecuado control de calidad previo de los resultados obtenidos para evitar el efecto deletéreo de los errores.
Al finalizar el curso, se realizará una prueba de examen para evaluar el nivel de conocimientos adquiridos por el alumno.
Programa:
Día 1:
Teoría:
Práctica: Extracción y purificación de DNA genómico en sangre.
Día 2:
Prácticas:
Día 3:
Teoría: Fragmentación enzimática del DNA.
Prácticas:
Teoría: Bases de la Amplificación de DNA mediante
PCR.
Día 4:
Práctica: Extracción de DNA en saliva.
Teoría: Detección de polimorfismos mediante SSCP.
Práctica: Detección de polimorfismos mediante SSCP (1).
Día 5:
Práctica: Detección de polimorfismos mediante SSCP (2).
Práctica: Detección de polimorfismos mediante RFLP (1).
Día 6:
Teoría: Aplicaciones de la amplificación del DNA mediante PCR.
Prácticas: Detección de polimorfismos mediante RFLP (2).
Día 7:
Práctica: Electroforesis y revelado de fragmentos de DNA e interpretación de resultados.
Teoría: Electroforesis capilar aplicada al DNA.
Práctica: Electroforesis capilar aplicada al DNA.
Día 8:
Teoría: Genómica: Different Display. RT-PCR Cualitativa.
Práctica: Transcripción inversa de RNA y amplificación de DNA complementario (DNAc) por RT-PCR.
Práctica: Preparación gel de agarosa para productos de RT-PCR.
Día 10:
Teoría: Genómica: Chips y arrays de DNA.
Prácticas: Electroforesis y visualización de productos de RT-PCR. Análisis de resultados. Genómica: Arrays de
DNA.
Día 11:
Teoría y Práctica: Bioinformática. Búsqueda en Bases de Datos.
Teoría:
Día 12:
Teoría y Prácticas: Secuenciación.
Día 13:
Teoría y Prácticas: RT-PCR cuantitativa en Tiempo Real.
Día 14:
Prácticas: RT-PCR cuantitativa en Tiempo Real.
Teoría: Proteómica.
Prácticas: Montaje gel 1ª dimensión.
Día 15:
Prácticas:
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